牛血清是細胞培養(yǎng)中用量zui大的天然培養(yǎng)基,其含有豐富的細胞生長所必需的營養(yǎng)成分,具有促進細胞增殖和誘導(dǎo)細胞分化等極其重要的生物學功能。本文締一生物/締一生物為您分析滅能對新生牛血清有什么影響?
對新生牛血清進行滅能處理可滅活血清中可能污染的病毒、支原體等外源微生物,但也可能使血清內(nèi)含有的細胞培養(yǎng)所需要的生物活性物質(zhì)變性降解,從而影響細胞的培養(yǎng)。
武漢生物制品研究所曾對滅能對新生牛血清的影響進行了研究。他們用照射劑量為8和16kGy 的60Coγ-射線及56℃30min加熱滅能新生牛血清,并和未滅能的新生牛血清分別培養(yǎng)Vero細胞和MRC-5 細胞。未滅能的新生牛血清培養(yǎng)的 Vero 細胞和MRC-5細胞狀態(tài),與傳代前形態(tài)一致,細胞呈致密單層;用8和16kGy 60Coγ-射線照射滅能的新生牛血清培養(yǎng)的Vero細胞和 MRC-5 細胞數(shù)量較少,每視野下約占 90%;經(jīng) 56 ℃30 min滅能的新生牛血清培養(yǎng)的 Vero 細胞和 MRC-5 細胞數(shù)量zui少,每視野下約占 50%。從生長曲線和倍增時間上看,未滅能新生牛血清培養(yǎng)的兩種細胞增殖更多更快速;其次是γ-射線照射滅能的血清,zui后是熱滅能的新生牛血清。
作者認為,γ-射線照射滅能和56℃30 min 熱滅能對新生牛血清中的成分均有一定程度的破壞,其中γ-射線照射對新生牛血清成分的破壞性較小,56 ℃30 min 熱滅能對新生牛血清的成分破壞性較大。
因此,如非實驗必要,則無需對新生牛血清進行熱滅活。
參考文獻
趙新華等. 滅能與未滅能新生牛血清培養(yǎng)細胞效果的比較. 中國生物制品學雜志. 2015, 28 ( 9): 923